Métodos de separação 27 - Cromatografia líquida de alta eficiência - Espectrometria de massas.

Fala galera Sou Eraldo Luiz ia ser mais um vídeo do canal analítica sem dúvidas pessoal continuando com os vídeos de pornografia líquida de alta eficiência hoje eu falar um pouco para vocês sobre o acoplamento da cromatografia líquida de alta eficiência com a espectrometria de massas mas antes continuar pessoal já vou pedir para você se inscrever no canal que ajuda bastante o canal continuar crescendo deixar um like no vídeo para terminar esse conteúdo um pouco mais relevante e também seguir o canal nas redes sociais Facebook Twitter e Instagram que eu tô deixando aqui na descrição do

vídeo agora sim pessoal fez tudo isso vamos para a aula Relembrando pessoal já falei sobre todas as partes de da parecer as partes principais e eu tô falando detectores e o Spector de massas na verdade é um detector então ele tá por isso que a partir do inverno de 4 de detectores já comentei com vocês Quais são as características que deve ter um Executor para aparecer além das tradicionais já falei dos eleitores de índice refração do experimento de luz os setores de uvis fluorescência molecular e na última aula eu falei dos leitores eletroquímicos e de

condutividade iônica hoje pessoal começar a falar para vocês o HP SMS mas hoje em dia o pessoal usa mais lcms na hora de falar de líquida de alta eficiência acoplada de massas os apenas lcms o HP ficou meio de Fora ele é um acoplamento muito mais complexo que aquele feito para o gcms por quê lembrando pessoal o spraymetro de massas mede Íons Na fase gasosa sobre alto vácuo bem então eu vou ionizar os analitos né criar íons eles vão para fase gasosa em vácuo e através de Campos eletromagnéticos eu conduzo ele até o meu detector

o que acontece Algar parecer trabalho com analitos pouco voláteis então como eu vou fazer para transformar esse narito pouco volátil em um analítico na fase vapor Então tem que criar técnicas de ionização compatíveis com soluções que eu vou falar para vocês agora de algumas técnicas que são acopladas a hplc e também obviamente necessário tirar a fase móvel durante a ionização então a técnica tem duas funções ionizar o analito e remover a fase móvel isso pessoal eleva o custo sempre falo que vai aparecer já é uma técnica cara por natureza no lugar aparecer acoplado a respeito

de massas no mínimo pessoal brincando deve começar em 500 mil dólares é bem caro acho que foi muitos mais caros existentes hoje no mercado agora pessoal as técnicas de ionização que são utilizadas em hplc São praticamente 4 a foto e organização a pressão atmosférica a indenização química a pressão atmosférica a ionização por eletronebolização e o fonte a fonte de plasma inutilmente acoplado vou falar de cada uma dessas quatro técnicas Ela é conhecida como a PPI da sigla em inglês atmosfera foto o eluído da coluna entra em um nebulizador aquecido acerca de 300 graus Celsius aproximadamente

e vai acontecer a secagem pelo aquecimento mas o uso de um gás inerte normalmente em nitrogênio e uma radiação ultravioleta vai excitar a molécula até ionizá-la Ou seja é um feixe de ultravioleta muito forte muito intenso o elétron do homo é promovido pelo lumo e continua absorvendo energia subindo nos próximos orbitais anti ligantes até ser ejetado da molécula tudo bem uma vez ionizado os íons são capturados por um capilar carregado o mecanismo de ionização por app pessoal é basicamente esse a molécula não é monolito absorve radiação ultravioleta como eu falei tem a transição do homolomo

excelente continua absorvendo essa energia é muito forte se fecha energético e que vai elevando o elétron cada vez mais alto nos orbitais até ele sair da molécula citado mas também a molécula por tabsorvendo radiação ultravioleta fica no estado essa molécula pode acabar colidindo com máquina de solvente ficando protonada roubando próton solvente deixando o solvente desproponado com uma carga negativa mas como daí pessoal o capilar tá carregado ele vai ter também um potencial negativo para atrair os íons positivos o solvente com carga negativa vai acabar sendo repelido e se perde no vácuo Tudo bem pessoal então

é basicamente Esse é o mecanismo organização por App aqui pessoal um esqueminha de como funciona o app tá pessoal então aqui ó tá vindo o HPC né o Eduardo da coluna aqui entra um gás nebulização então forma o spray é idêntico o pessoal a técnica de nebulização para expressar todos os conjuntos é aquecido o gás também acaba crescendo e isso vai secando o solvente aqui tem a radiação ultravioleta que acaba formando fecho aqui a hora que os maridos chegam aqui eles são ionizados Aqui também tá entrando gás tá vendo para ajudar secagem e aqui os

íons positivos são capturados por esse capilar carregado Tudo bem pessoal Então esse é basicamente o funcionamento do app o próximo pessoal é organização química a pressão atmosférica é conhecido como a PCI de atmosfera Pressure ionization também vai ser muito parecido pessoal também é um nebulizador evaporador aquecido 300 graus aproximadamente vai até a secagem da fase móvel com aquecimento nas gazenete normalmente nitrogênio novamente só que agora pessoal eu vou aplicar um potencial de entre 3 até 5 kg em uma ponta de agulha na saída do nebulizador que a gente chama de descarga Corona tudo bem essa

vai acabar ionizando os analitos novamente são capturados elevados por um capilar para o espectrômetro de massas o mecanismo o gás agora que vai estar maior concentração é ionizado para descarga o gás pode colidir com solvente ficando protonado 10 novamente solvente desproponado vai ser eliminado por repulsão e agora o gás protonado protona a molécula do meu analito tudo bem pessoal notem é muito parecido com a indenização química que eu falei em gcms enquanto a PPI é muito parecido com a ionização por Impacto de elétrons tudo bem só que aqui eu vou ter apenas a formação do

Iam protonado lá no app eu posso ter o íon livre né o íon molecular que a gente chama essas técnicas pessoal são técnicas brandas de ionização dificilmente vão causar fragmentações Tudo bem então é comum em LC ou HP LC MS eu t selas e reação e colisão como o tribo 4 Polo para fragmentar os meus íons aqui pessoal a construção é muito parecida com a PPI aqui novamente a célula aparecer gás nebulização a câmara de evaporação o gás secante e aqui em vez de ser a luz UV eu tenho uma agulha que vai dar um

potencial muito forte é um choque na molécula quase e os íons novamente são capturados algumas vezes pessoal pode ser você encontre os dois juntos né o app e o PCI né no mesmo saída simioniza por uma forma ioniza outra Tudo bem pessoal Então olha a construção é muito parecida a ionização por eletronebolização Pessoal esse nome eu vi só no Scooby por estou usando oficialmente todo mundo fala eletron spray ou esi direto transplay ionization bem É o que você mais vai ouvir normalmente tanto em palestras até nas aulas de massa mesmo Professor use e z não

eletronebolização tá então fica aí agora os naritos pessoal são quimicamente analizados antes da estreitamento de massas Tudo bem então eu preciso colocar alguns modificadores químicos na minha fase móvel como ácido fórmico para protonar compostos básicos né então vou gerar o íon pro outro lado e amônia para compostos ácidos que eu vou gerar o íon Destro tunado com carga negativa Tudo bem então é normal quando você sabe dizer para exi positivo e exi negativo Então esse Positivo eu vou medir íons positivos eu vou usar ácido fórmico como modificador químico se eu falar existe negativo eu vou

desprotunar os compostos com amônia e medi íons negativos agora tudo bem Então essa é a forma de ionização é uma é uma ionização é uma geração de carga antes da detecção normalmente Pode ser até que a fase móvel com o tempo de amônia ou ácido fórmico para ajudar nessa ionização tudo bem daí pessoal de novo a fase nova nebulizada e aquecida 300 graus a secagem é feita com gás nerd aquecimento só que daí pessoal na ponta desse nebulizador eu vou aplicar um potencial para ajudar na ejeção dos anelitos então se eu quero realizar íons positivos

vou aplicar um potencial positivo no meu nebulizador isso vai atrair os erros negativos e repelir os íons positivos dessa forma vai favorecer ainda mais a ejeção 200 positivos da gotícula que já vai estar secando Então imagina pessoal a condição é essa eu vou ter uma gota tem íons positivos e os negativos o potencial Positivo na ponta do capilar de nebulização vai atrair os íons negativos então vai ficar sonham Positivo já vai aumentar a repção repulsão tá aumentando aumentando aumentando enquanto está secando a solução a gotícula então eu tô aproximando cada vez mais as cargas obviamente

cargas iguais nos repelir eu acabo forçando a injeção dessas cargas né e um dispositivos no caso se for modo positivo da gotícula de solvente Tudo bem pessoal ficou claro como funciona Então pessoal que é o esquema do EZ que eu falei aqui ó deixa eu ver oxidação porque tá traindo negativo né e a redução que seria essa imagem da internet não tá terminando muito legal daqui a um potencial positivo aqui é um potência negativo aqui eu atrai todos os negativos ficou só os positivos na gotícula ficou menos e uns negativos com mais de uns positivos

você cansando secando a ponto de a própria repulsão eletrostática ejetar os íons da gotícula tudo bem pessoal só uma curiosidade Aqui você encontra isso e muitos manuais inclusive aulas as características para cada analito normalmente app e a PCI é quase a mesma Gama de analitos tá vendo o apc pode ter alguns compostos por mais polares e maior polaridade tá razão de massa molar também né é maior já o Eletro spray moléculas muito grandes proteínas polímeros usar também muito spray e muito polares porque tem que ter 11 positivo ou um sítio ácido básico para ser modificado

Tudo bem pessoal mas é mais curiosidade e a fonte de plasma indativamente acoplado Espera aí eu já não falei disso fontes de plasma sim é o L6 cpms pessoal ou seja um ICMS é ligado ao hplc o ilude da coluna é jogado no nebulizador de cpms então tem todos os processos nebulização que ocorrem na espectrometria Só que nesse caso pessoal tem que ser uma fase móvel muito polar com baixo concentração de solvente porque muito solvente pode atrapalhar na formação do plasma Pode distinguir o plasma bem pessoal próximo de orgulho vai acabar atomizando os naritos e

ionizando como é feito em MS mesmo ele é muito utilizado para identificar e quantificar espécies ligadas a metais como proteínas então por exemplo nosso laboratório de terminava é proteínas ligadas a metais então fazer um CeC para separar as proteínas e medir por exemplo ferro porque ela terminando o ferro de CP eu sabia quanto uma proteína ligada ferro tava sendo evoluída naquela coluna aquela corrida por exemplo também metalo metabólicos então por exemplo uma pessoa da contaminada com argumentar pesado Eu pago a mão de urina dela quero saber quais espécies metal pesado pode ter Então faça a

separação dos metabolos uma coluna apropriada e determina o elemento via ecp MS também é utilizado para análise de espessação O que é isso quero saber não só quanto tem de um elemento Mas quais espécies estão presentes por exemplo o Arsênio é um contaminante ambiental muito importante né é muito tóxico e tem várias espécies podem distribuir de acordo com a química do corpo aquático pode ter algumas espécies metiladas ou espécies anônicas Então posso pegar minha amostra fazendo tratamento adequado escorpa Aquático fazer uma corrida por troqueiônica e eu vou separar os compostos de Arsênio que depois são

atomizados ionizados no cpms Tudo bem pessoal então ainda assim o complemento muito difícil porque eu falei tem que ser pouco solvente orgânico para não extinguir o plasma chega muito solvente lá pode acabar danificando toda parte da Tocha de CPF aquela parte de quarto que eu já falei vou deixar aqui no Card todos os vídeos de Neo playlist de cpms tudo bem tá aqui uma figura pessoal então é HPC aqui vai todos os mecanismos ó the Gazer sistema de propulsão os injetores a coluna daqui às vezes pode até ter uma troca de solvente colocar mais por

exemplo uma solução mais ácida para ajudar a diminuir a construção de solvente na nebulização nebolizada o excesso épodreno e alguns íons em alguns maridos vão para tosse de CP que acaba sendo ionizado e indo para o espectro de massas tudo bem em relação pessoal aos analisadores de massa ele pode ser o quadrupolo tá então como eu já falei igual ao gcms e ao ICP MS um triplo com a do Polo que é chamado de LC msms ou também MS Como eu disse pessoal as técnicas de app apc e z normalmente geram o íomolecular ou íon

protonado não gera fragmentos então é muito comum ter um triplo colo para forçar a fragmentação e assim gerar o espectro de massas em si tudo bem pode ser o toque também Will Trap web Trap já farei todos eles ou na aula GC ou na aula de CP não lembra eu vou deixar todos os cards aqui E tem também pessoal um que é um dos mais caros inclusive que eu vi alguns trabalhos vou comentar sobre ele que é ressonância ciclotronica de íons com transformadas de fourier vou falar dele agora o editor por ressonância ciclo tônica de

íons é conhecido como FT e CR da sigla em inglês foi section ele é um equipamento de alta resolução ou seja ele é capaz de separar íons pelo defeito de massa eu já comentei o que é defeito de massa nas aulas de CP Tá mas lembrando basicamente o próton e o neutro não tem a mesma carga de ser uma pequena diferença de massa tá só foi carga massa então por exemplo o ferro não é 56 é 56,9 alguma coisa é assim por diante então todas iam todas as moléculas os átomos tem alguns decimais de massa

exata que a gente chama isso é muito em quântica tá pessoal não vai entrar muitos detalhes aqui tá seja tem alguns décimos centésimos de massa atômica pessoal vou ficar preso entre dois pares eletrodos e dois pares de detectores esse retrodos vão alternando os potenciais fazendo o íon se movimentar em movimento circular por isso que a ressonância ciclotrônica daí quanto menor o íon menor massa razão massa carga maior vai ser a velocidade desse ciclo tá então ele vai ficar girando mais rápido mais rápido mais rápido enquanto mais próximo mais pesadas e maior razão massa carga vão

ter um tempo de resolução uma frequência menor se aproximando se afastando 12tectores vou causando o sinal transiente e de frequência constante em função da Razão massa carga então aqui pessoal uma figura tá aqui então os íons com girando aqui em ver temos o campo eletromagnético em laranjas sectores Então os íons vão girando aqui tem algumas placas também para manter os íons dentro do detector isso vai gerar um sinal transficiente né vai subindo descendo subindo descendo que por transformar de fourier depois alguns cálculos de campo eletromagnético eu chego no espectro de massas pessoal eu tava editando

o vídeo preço por um cortezinho aqui podem ver que camiseta diferente Acabei de chegar da academia eu encontrei um vídeo uma animação mostrando o funcionamento do FT e CR com fonte e z Então pessoal vou deixar aqui na descrição é um vídeo antigo Tá mas tá bem legal bem bacana do canal eu não vou por aqui obviamente por causa de direitos autorais tudo bem é pessoal clique aqui no link que eu vou deixar na descrição vai ser demonstração esft CR que pode ajudar vocês a entender melhor a técnica tudo bem agora sim vamos a programação

normal Então é isso pessoal isso foi mais um vídeo do canal Espero que tenham gostado pessoal chegou até aqui se inscreve no canal ative as notificações deixem um like no vídeo isso é muito importante para ajudar o canal a continuar crescendo e a plataforma entender que esse conteúdo é relevante quem quiser e puder colaborar financeiramente com o canal o botão Valeu demais já está ativo vocês podem doar lembrando uma doação não é obrigatório qualquer valor a partir de um real sigam também pessoal os canais nas redes sociais Facebook Twitter e Instagram que eu vou deixar

aqui na tela e também no na descrição desse vídeo dúvidas pessoal Pode ser ou deixadas nos comentários ou enviados por e-mail no e-mail que é sem dúvidas@gmail.com ou também através das redes sociais lembrando só mais ativo no Instagram confiram pessoal outras playlists que eu vou deixar aqui tá eu pensei outros conteúdos que você pode também estar com dúvidas em química analítica tudo bem E também outros vídeos do canal é tudo por hoje pessoal até a próxima valeu tchau