S05_V01 - Avaliação laboratorial de proteínas plasmáticas

e há uma variedade enorme de proteína circulando em nosso sangue muitas vezes é de interesse Clínico avaliar as concentrações de proteínas específicas como um marcador tumoral ou marcador de inflamação aguda como é o caso da proteína C reativa por exemplo entretanto os principais exames utilizados no laboratório clínico para se avaliar proteínas do sangue são os exames de proteínas totais e frações e a eletroforese de proteínas plasmáticas o exame de proteínas totais e frações é um exame puramente quantitativo através desse exame laboratório vai determinar as concentrações de proteínas totais e a concentração de Albumina que a

principal proteína plasmática é o para isso utilizaremos métodos já conhecidos como método de biureto para proteínas totais e o método do verde de bromocresol para dosagem de Albumina ambos métodos puramente colorimétrico já o exame de eletroforese de proteínas plasmáticas é um exame Vivo e qualitativo então é possível determinar a concentração das principais frações de proteínas do plasma e também através desse exame de eletroforese a gente consegue avaliar o o fio de proteína do plasma então por isso que ele também é qualitativa e e aqui o exemplo do laudo envolvendo o exame de proteínas totais e

frações não percebam que no laudo consta a concentração de proteínas totais as 7,20 gramas por decilitro concentração de Albumina 4,90 gramas por decilitro Lembrando que proteínas totais é da usado pelo método do biureto enquanto que a albumina é causada pelo método do verde de bromocresol e abaixo a gente Z globulina o valor de 2,30 gramas por decilitro importante fica claro que nesse exame aqui a globulina ela não é medida de fato no laboratório e sim calculada Então se a gente fizer a diferença do valor de proteínas totais como o valor o 7,20 - 4,90 a

gente não é obter exatamente 2,30 Ok então também é importante ficar claro que enquanto Albumina Eu me refiro a uma proteína específica chamada de Albumina o caso da globulina eu não me refiro a uma proteína específica Então na verdade aqui esse 2,30 gramas por decilitro e respeito à concentração e um conjunto de proteína que estão dentro dessa classe conhecida como Globo Lima Thaís pode ficar mais claro quando a gente falar sobre a eletroforese e e na eletroforese que é um método de forma geral utilizado para separar moléculas tá com base na carga e no tamanho

da molécula então na eletroforese a gente vai aplicar a a nossa mostra que geralmente é sua o Lu então submete essas proteínas aí do soro a uma corrida eletroforética então a as proteínas vão migrar com base na sua carga e no seu peso molecular é importante fica claro que a esse gel que geralmente é um gel de agarose tá a ele está submerso no tampão básico ok Porque assim a gente garante a que todas as proteínas do soro elas vão tá com carga negativa e aí eu tenho uma corrida de forma padronizada ou todos proteínas

vão partir do polo negativo a indicação ao Polo positivo e depois as proteínas esse gel vai ser cobrado para que a gente possa visualizar as bandas nesse gel então a após uma corrida eletroforética a gente tem uma imagem mais ou menos desse tipo ou de claramente a gente percebe uma logo aqui no início na parte mais próximo ao Polo positivo uma banda bastante intensa que a banda da Albumina são conforme a gente já falou alguma mina é a proteína mais abundante do plasma então por isso que a banda é tão intensa em seguida a gente

tem em outras bandas que diz respeito à conjuntos a grupos de proteínas que são classificados da nas bandas das globulinas E para isso a gente vai ter quatro bandas de globulinas a banda Alfa 1 globulina a banda Alfa 2 a banda das Beta globulinas EA Banda das gamaglobulinas as aqui o final né uma grande mancha e diz respeito justamente as imunoglobulinas ou seja os anticorpos em então aqui eu tenho uma análise qualitativa Trás semi-quantitativa uma vez que a intensidade da banda está relacionada com a concentração nos proteínas entretanto eu consigo ter uma análise quantitativa né

mas precisa se eu submeter esse meu gel é um desse hein tometro então através desse equipamento a gente consegue é realmente medir a quantidade de proteínas através da intensidade da banda E aí o transforma essas bandas do gel em Picos então é possível determinar a área aqui abaixo de cada pico e essa área vai estar relacionada com a concentração de proteína então aqui mais uma vez a gente vê que as proteínas plasmáticas nessa proteínas do sangue elas podem ser agrupada em cinco bandas a partir do perfil eletroforético são as bandas da albumina e da Alfa

1 globulina Alfa 2 globulina beta-globulina e Gama globulina Ok então conforme eu falei cada banda dessa comprei ele o conjunto de proteína e aqui a gente atrás no esquema as principais então por exemplo na alça um eu tenho a antitripsina Alfa fetoproteína como exemplos de proteínas que estão nessa nessa nessa categoria na Alfa 2 eu tenho haptoglobina ceruloplasmina né mapa de Albumina na Banda das Velhas ele tem transferrina tem um componente C3 Beta lipoproteínas e na Banda Gama como eu falei é a banda que contém as imunoglobulinas E aí a gente tem diferentes tipos de

imunoglobulinas tá e g a BM g d e por isso que essa banda é tão difusa tá porque tem um conjunto de moléculas bastante diferentes aí ó é a principal aplicação a principal utilidade eletroforese de proteínas plasmáticas atualmente é no diagnóstico Laboratorial do mieloma múltiplo que é uma das principais gamopatias monoclonais Ia onde eu tenho a o aumento a proliferação desordenada de um plano específico né e de células produtoras de anticorpos e plasmócitos e o que que acontece E aí eu vou ter uma produção específica de um único tipo de anticorpo então por isso que

a banda difusa né que deveria ser difusa a banda das Gamas Globo Minas ela se transforma no pico monoclonal Ah tá porque aqui eu passo até a predominância de um único tipo de imunoglobulina e esse é um achado muito marcante no diagnóstico Laboratorial do mieloma múltiplo e aqui gente observa o padrão eletroforético tanto no soro outro da urina de um paciente com mieloma múltiplo que observa em aqui uma intensa banda aqui na na faixa das meninas logo meninas tá então como eu falei uma banda que deveria ser difusa na verdade ela tá uma conta intensa

em virtude da do Pico monoclonal né concentração elevada de um único tipo de imunoglobulina e quando a gente faz a eletroforese da urina é a gente também observa uma banda extremamente intensa que também aqui próximo a faixa das da banda das gamaglobulina Na verdade essa daqui essas proteínas que estão em excesso na urina são justamente as cadeias leves uma das imunoglobulinas né que são produzidas em consequência da neoplasia né da desordem que é o mieloma Mult essa proteína essas cadeias leves que são encontradas em excesso na urina é que são conhecidas como a proteína de

bence-jones a que historicamente foi identificada pelo Doutor dance de homens e passou a ser um achado marcante o diagnóstico Laboratorial do meu aluno então a é possível Inclusive a gente a detectar a presença dessa proteína na urina através de um exame conhecido como proteína de bence-jones exame relativamente simples onde a gente vai pegar a urina do paciente aquece essa urina bom então quando passa por essa faixa de temperatura em torno de 45 a 60 graus ela essas cadeias leves que estão em excesso na urina ela se precipitam né e é isso pode ser visualizado que

nessa nessa urina fazendo assim a confirmação da presença da proteína de bence-jones que na verdade as cadeias leves em excesso você num diagnóstico com um achado Laboratorial ou alto valor preditivo positivo para o mieloma múltiplo