IMUNOLOGIA- Aula prática: Aglutinação do látex

E aí hoje nessa aula prática de imunologia nós vamos fazer hoje um imune saio chamado reação de aglutinação em látex nós vamos fazer no primeiro momento para o fator reumatóide e para o PCR proteína C reativa que que a gente precisa a gente precisa do kit de aglutinação em látex que é composto por um controle positivo com a tampa vermelha o látex sensibilizado conforme o reagente conforme o antígeno ou anticorpo que estará na superfície do látex e aqui o controle negativo é precisaremos também de pipetas e ponteiras o soro do do paciente teste assim como

essa lâmina aonde a gente tem essas áreas e círculos escurecidos porque o látex é branco e aí a Anitta leitura quando a gente tem esse fundo escuro tá então aqui que nós vamos fazer primeiro eu vou colocar aqui nesse círculo o controle positivo depois o controle negativo e aqui o soro teste nesta primeira linha eu vou fazer por fator reumatoide então a gente precisa tomar cuidado de verificar se eu estou com kit certo então primeiro eu vou fazer para fator numa tarde né então eu tô com controle positivo eu peguei aqui a minha pepeta preciso

de apenas 25 micro litros tô tomando cuidado para não ter bolha eu vou colocar aqui e no controle positivo nessa área 25 mil litros em troca ponteira ó e vou colocar na minha sequência que eu padronizei e o controle negativo o 25 micro litros cuidado na hora de dispensar para não fazer que nem eu fiz no primeiro ele que eu coloquei bolha E aí e na sequência eu vou colocar o soro do meu paciente que eu vou testar para fator reumatoide 25 litros e para Sr E aí e eu já vou fazer também do do

PC eu vou colocar aproveitando a ponteira eu vou colocar aqui o 25 micro litros do soro do paciente nessa área aqui que tá identificada como 5 eu vou então colocar na área quatro o controle positivo do PCR E aí E aí E aí o e seguindo meu esquema de padronização o controle negativo e do pccr da proteína C reativa na área 61 G1 E como eu optei por colocar numa sequência todos os controles e o sobre teste agora eu preciso tomar cuidado para não confundir o látex então aqui é o látex do fator reumatoide que

eu vou agitar levemente e vou colocar sobre os controles Oi e o soro teste da primeira linha bom então vai ser 25 micro litros aqui não toque no controle não toque a ponteira ponta da ponteira no soro aqui O que é e não é mesmo não sei conheça eu já vou pegar esses batonzinhos e vou homogenizar e a cada batonzinho para o Mário o cuidado para não contaminar com as áreas vizinhas até quando toca e nessa placa E aí E aí e rapidamente eu vou fazer a linha de baixo colocando látex para a PCR E

aí E aí o 25 me coloridos no controle positivo o 25 micro litros no nordeste Não toque na ponteira no no reagente e aqui 25 muito litros só o controle negativo mesma coisa usando pastor resinas diferentes e vamos homogenizar e aqui eu prefiro fazer no mesmo momento para tu arrumar Toy do PCR testá-lo poderia ter feito separadamente primeiro fator reumatoide depois né controle de cada um teste depois o PCR um outro momento a homogenization na sequência agora a gente vai pegar essa lâmina e vai fazer leves mundo leves movimentos posso fazer em movimento circular leve

tomando cuidado para não misturar os reagentes nós vamos fazer isso por dois minutos E aí e após então dois minutos nós já temos aqui o resultado então Verifique que aqui é a primeira linha era para fator reumatoide aqui controle positivo teste o controle negativo aqui era para PCR controle positivo teste controle negativo é quando que a gente considera que o resultado é positivo é quando a gente tem a presença de uma aglutinação fina Então olha aqui nessa área dois óleo soro teste o soro do meu paciente né veja que existe essa aglutinação fina mas eu

preciso fazer sempre o controle positivo e o controle negativo então eu comparo o meu resultado do soro teste com a área um que eu combinei que era o controle positivo Então veja e como o soro teste aparência final é mais semelhante autocontrole positivo Então esse aqui é um Resultado positivo para fator reumatoide a linha de baixo a gente tá vendo para PCR Olha que o soro teste ele tá mais semelhante ao controle negativo que tem ausência de aglutinação se vocês olharem né que o controle positivo controle positivo Tá bem aglutinado então aqui a gente teve

um Resultado positivo para fator reumatóide e aqui o resultado negativo para PCR em relação agora a quantidade a gente precisa consultar sempre o kit a bula do fabricante por exemplo para fator reumatoide nesse kit é considerado pose é né a gente viu quando for uma Essa aglutinação é isso significa segunda se fabricante a concentração do fator reumatoide no soro da pessoa era igual ou superior a oito unidades internacionais por ml é a gente também poderia ter feito um teste semi-quantitativo onde a gente vai diluir o soro desse paciente então a gente podia pegar uma solução

Salina e dilui esse soro do paciente Um para dois não tá 4118 não tá 16 e mais de Ilusões se fosse necessário é interessante que a gente ia como que daria o resultado né a gente pegaria o título da mostra correspondente a maior diluição em que ocorreu aglutinação Oi e a gente faz um cálculo que é oito segundo esse fabricante né oito que a sensibilidade do teste porque ele é considerado positivo uma concentração maior do que oito unidades internacionais por ml então a gente pegaria oito que a sensibilidade do teste e multiplicaria pela maior diluição

Exemplo né É se Desce a continuação até um para oito eu pegaria então oito que a sensibilidade o teste e multiplicaria por 8 que era o fator de diluição então eu teria que esse paciente tem eh 64 unidades internacionais por ml de fator reumatóide no soro em relação agora o PCR o nosso resultado foi negativo e isso segundo esse kit esse fabricante significa que a concentração o menor que 6 miligramas por litro se desse uma aglutinação se o resultado fosse positivo significaria que a concentração de PCR no soro da pessoa era igual ou superior a

6 MG por litro na sequência a gente vai fazer um outro paciente e nós vamos pesquisar o asilo e de novo o PCR bom então agora nós temos aqui continuando a reação de aglutinação em látex nós temos um segundo soro de um outro paciente que o médico pediu para pesquisar por exemplo ASLO e PCR asilo é um anticorpo anti estreptolisina sol é quando pede para dosar o asilo é quer se verificar se já existiu uma exposição prévia ao streptococcus pyogenes são se o asilo de positivo da é a gente quer dizer que já existiu uma

infecção prévia pelo streptococcus pyogenes aqui para adiantar na primeira linha dessa placa Eu já coloquei o controle positivo soro teste o controle negativo para asilo usando esse kit aqui então tomando cuidado que tudo tem que estar escrito no rótulo que a Zulu que a gente tá fazendo esse teste na linha de baixo e foi pedido também o PCR e eu já coloquei aqui o controle positivo aqui o soro teste que é que o controle negativo então mesma coisa que é o kit do PCR certo então agora tomando cuidado eu vou ter que pingar e o

látex sensibilizado aqui primeiro para pesquisar o asilo eu vou pesquisar vou pegar aqui no controle positivo e sem tocar com inteira no reagente aqui no teste ó e aqui no controle negativo é E aí E aí a carta ponteirinha e aí nós vamos usar o bastãozinho e entra cada área tomando cuidado para não contaminar com vizinho E aí em consequência eu pego uma outra ponteira e agora na linha de baixo ou PCR bom então dá uma ajeitadinha e vamos ao látex para pesquisar a presença de PCR proteína C reativa no couro tão que eu coloquei

sobre o controle positivo e no soroteste E aí ó e aqui no controle negativo 1 é essa meu reagente para não derrubar na bancada e mesma coisa os pasteizinhos um para cada um e aqui eu tô me organizando controle positivo aqui vou homogenizar polyfest com látex sensibilizado ó e aqui o controle negativo é E aí e na sequência iremos fazer também aqueles movimentos circulares ou movimentos assim tomando cuidado e Para não misturar os reagentes Então vamos esperar 2 minutos E aí E então após dois minutos aqui nós já temos o resultado né então aqui na

linha de cima é o azulo veja que aqui o soro teste apresenta aglutinação fina o controle o controle negativo é bem leitoso né Então olha que você tem o controle positivo que tem aglutinação E olha que o soro teste também com essa aglutinação então Esse resultado é um Resultado positivo que tem essa aglutinação tênue ou uma aglutinação nítida aqui no caso aglutinação tá bem nítido segunda esse fabricante significa que a concentração de asilo é igual ou superior a 200 unidades internacional e por ml E é em relação ao pccr tá até mais nítido né você

tem aqui o soro teste que tá bem aglutinado o controle negativo continua leitoso então o soro teste tá mais semelhante ao controle positivo controle positivo a continuação é tão intensa que os grumos foram até para a periferia da Gota certo então aqui a gente também teve um Resultado positivo para PCR como eu já disse na gravação na parte da do da primeira gravação com o soro do primeiro paciente PCR aqui deu positivo significa para esse kit desse fabricante concentração igual ou superior a 6 MG por litro de PCR certo vamos encerrar mostrando bem para vocês

a lâmina O que é isso reação de aglutinação do látex aqui para no primeiro tempo foi para fator reumatoide PCR um paciente com suspeita de Artrite reumatoide por exemplo e agora que é um segundo soro de paciente para pesquisar afro relacionado a infecção prévia por streptococcus pyogenes e foi pedido também para dosar PCR então Possivelmente uma pesquisa se esse paciente tem um quadro de febre reumática certo então até pro 1