Determinação de Proteínas pelo Método Kjeldahl

olá pessoal nós estamos aqui então laboratório pra desenvolver mais uma técnica com vocês quantificação de um dos elementos que compõem a composição centesimal dos alimentos hoje eu vou explicar para vocês como é que a gente determina as proteínas nos alimentos o método se chama metros determinação de nitrogênio ou proteinado pelo método que geral eu vou mostrar obviamente não vai ser uma técnica que eu consiga desenvolver toda ela mas eu vou fazer uma simulação vocês vão conseguir compreender as etapas que compõem esse merda então eu trouxe pra vocês um procedimento esse procedimento ou é dispor para

vocês na página para que vocês tenham acesso como ele é funcionar é um método oficial seja aqui no brasil ou seja em qualquer parte do mundo vocês vão ter esse né porque a meta oficial reconhecido pelos órgãos nacionais internacionais de quantificação de proteínas então o que acontece bom existir três fases da quantificação de proteína a digestão a destilação e articulação então eu quero mostrar para vocês no início que na digestão o que eu fiz eu pesei a quantidade de amostras 0 3 gramas de amostra onde é que eu pesei dentro desse tubo tá é essa

cor que está agora aqui é porque já tem outros reagentes que eu vou mostrar o que eu coloquei então por 0 3 gramas de amostra qualquer amostra que eu queira quantificar de alimentos eu pergunto sempre um papel né pra poder colocar aqui dentro depois disso eu coloquei o que 5 ml de ácido sulfúrico vocês podem observar aqui ó a suco rico está concentrado pea para análise coloquei ali 5ms por isso que vocês observam um líquido né dentro desse tubo e eu coloquei o que também alguns algumas gramas 07 gramas de uma mistura catalítica ou mistura

de gestora então a mostra que eu quero saber é o ácido sulfúrico é o que vai fazer em composição desse material dentro desse tubo ea mistura catalítica vai servir somente para elevar o ponto de ebulição de teatro puro porque ele atingir somente o 180graus mas quando o bota essa mistura catalítica esse é um ponto de ebulição vai a 300 400 graus isso me permite uma gestão vou mostrar agora a reação química que acontecer dentro o que é muito importante que você observa então eu vou ligar esse bloco esse bloco que o chamado bloco de gestor

por isso essa análise essa etapa é a digestão esse bloco com esse ligado até então vocês estão vendo aqui que a temperatura está aumentando eu vou levar ele até 150 graus quando atinge 150 graus eu vou aumentar para mais 100 graus e assim de 30 em 30 minutos o gol e levando essa temperatura até 450 graus então essa mostra aqui fica talvez por isso vai depender muito do teor de nitrogênio teor de proteína mas normalmente fica de três a quatro horas essa mostra de cheirinho a 450 graus em conta quatro futuro dessa mistura de gestora

ok então a etapa de gestão que consiste nesse procedimento eu gostaria de mostrar pra vocês uma outra coisa muito importante nesse momento a gente não tá quantificando o neo onde poderei é só uma simulação à capela com esse equipamento que você observando ela não tá ligado só vou ligar um pouquinho pra você observar o barulho [Aplausos] rital 10 barulho se eu deixasse ela ligada a nós talvez você não conseguir ouvir muito bem e começou uma simulação ele não precisa estar ligado mas rio há nada estivesse acontecendo e se essa situação deve acontecer dentro de uma

capela porque é bom ser eliminados gases tóxicos que se eu tiver contato com ele como intoxicar então a capela é um equipamento de proteção coletiva equipamentos de proteção que vai servir de proteção contra a qualquer dano que alguma reação um é metabólica 11 de fato dessa nação possa causar então sempre eu vou fazer a gestão dentro de um sistema de papel hoje existem alguns equipamentos hoje que tem acoplado a esse golpe o gestor uma captação de gases né elimina primeira série na digestão então o que vai acontecer tecnicamente eu coloquei ácido sulfúrico em contato com

a matéria orgânica que é o alimento que eu quero quantificar as proteínas junto de uma mistura qatari dica você observe que nessa reação química eu não coloquei aqui a mistura catalítica porque ela não serve ela não está entrando na reação química ela só serve como um elevador do da ebulição a temperatura de ebulição de siafi então esse aço puro em contato com a matéria orgânica vai produzir no final dessa gestão sulfato de amônia isso é muito importante para a próxima etapa que a gente vai trabalhar observe que proteína tem nitrogênio e como método diz eu

estou qualificando o nitrogênio então na verdade essa determinação de pé pelo método de natal determina o nitrogênio garimpar liturgia as diferentes fases e no final é muito importante vou mostrar pra vocês que até o cálculo ele vai converter ali que ele vai fazer a condição do nitrogênio em proteína recurso porque eu quantificam metrô gênio depois disso me converte em proteína porque as proteínas a maioria delas ou aliás todas elas são constituídas de hidrogênio normalmente 16 15 14 por cento do seu peso molecular de nitrogênio pode ficar o nitrogênio depois na fórmula que na fórmula matemática

eu convenci pior não essa fragilidade gestão nós vamos agora para a outra fase que é destilação só então nós finalizamos da etapa da distinção eo e no momento final da etapa de gestão é quando isso acontece o material foi condenado agora é o número esperado tem mais fraquinho porque a tendência é quando sai do bloco de gestor cyber geral da bp esse é o momento que a gente disse que a digestão aconteceu corretamente que a mencionada pra vocês que aconteceria diferença classifica o momento que observar mesmo de ser gestão aconteceu é o que ficou deliberado

na reunião não conseguia pegar se tudo na mão se não tivesse a frio você se lembra que estava trabalhando com uma temperatura de 450 graças a um método ó saída de gestão a mostra o correto esmeralda é bom para a destilação na destinação eu vou pegar aquele material está verde esmeralda mostra e transferir pronto do aparelho da destilação qual auxílio de um mapa nacional pressionou do 18 maior que é o equipamento o método disso não posso colocar uma tábua não pode não posso colocar tanta água que seja superior o suficiente eu vou a coplac do

equipamento esse equipamento aqui esse sistema as reações químicas pode acontecer são necessárias que acontece todas num sistema fechado trabalhar com sistema fechadinho e qualidade bom voltando a meta nossa também era difícil depois do tempo um é primeiro vou colocar 10 ml de ácido bórico a 2 por cento então fiz uma solução de ácido bórico 2% coloquei aqui dentro com auxílio de uma proveta meta de 3 a 5 gotas indicador mesmo dentro da empresa 5 a solução declara fica agora vermelho vermelho então todas essas coisas também importante pra gente saber se está fazendo por onde as

concentrações das soluções escutar corretamente coloca você vai ter lá um a tap para conter o enem a próxima vez eu vou adaptar e colocar cuidadosamente 15 meios de hidróxido de sódio no copo dosador que copo dosador então tá aqui o nh hidróxido de sódio 50% eu vou colocar no copo dosador esse aqui é o copo dosador do destilador é importante você observar aqui que o saque em cima este lador de nitrogênio se você lembra que o mencionado nós vamos quantificar proteína nós vamos quantificar nitrogênio aqui bem importante eu nessa aqui né 15 ml sempre na

altura dos olhos à medida que eu tô feito colocar agora vai poder ser o que eu vou ligar o equipamento a ew livre para ligar o equipamento aqui dentro existe uma caldeira e vai aconteceu a reação química necessária e ela só vai acontecer quando o sistema estiver tudo fechado como emerson nem o sistema está todo fechadinho não tem povo sair nenhum lugar e vai ser importante para tomar um café [Música] à medida que aumenta a temperatura o que vai acontecer eu quero você observe as reações químicas isso fato de amônio saiu lá da digestão dentro

daquele naquela cor verde esmeralda nós tínhamos o fato de amônia em contato com ele ou hp que eu coloquei a 15 mal dentro de si próprio jogador vai acontecer o que ele voltará a reação ele aqui dentro ainda vai formar hidróxido de amônia quando eu aquecer o sistema esse é esse nitrogênio pode se converter em amônia na forma de gás é esse amor é na forma de gás e vai tentar colaborar vai para dentro desse caminho branco e vai pensar sempre coloque de selva fechada e vai rodar e ele só tem um caminho a percorrer

que aqui ele volta a isto chama um destilador de respirar dentro ele tem nada nesses bicho adotem a maioria entrando no sistema então o gás entrando com a superfície fria ele tende a compensar ficar muito e esse livro é coletado pop dentro de sendai e à medida que o líquido começará a ser coletado essa cor vermelha vai ficar verde ea igual quando completar 75 ml de silicone esse livro agora o mesmo vermelho vai fazer a coleta desligue o sistema podem e faça a sua destinação acompanhando a minha reação tão só para recapitular tinha hidróxido de

sódio tubo em contato com a sua obra foi o hidróxido de amônio e ele vai ser aquecido e sidras de amônio vai formar um gás amônia juntamente com a água a água vai ficar no sistema aqui e o gasto é tentar record encontrando esse caso encontrando o passe do moro está dentro é e foi formado por ato de amor então aqui dentro de si é eu não vou comentar o que boratto de amônia que é necessário para a próxima etapa que é a titulação boratto de amônia é uma base e lá eu vou titular como

uma solução fácil eu costumo dizer né na verdade não eu mas o método é uma investigação basta um toque através de eu consigo quantificar o teórico do gênio depois a gente vai entender como esse teor de nitrogênio coletiva e proteína beleza vamos para a próxima etapa othon finalizada a parte da destilação nós vamos ter a última etapa então como eu mencionei pra vocês um momento final que acontece essa etapa aqui é quando o colega 75 ml e o livro você observar que fazendeiros ok então nós vamos agora para completar esse material que eu vou continuar

a acompanhar passamos pela diversão passamos pela destilação e agora estamos na titulação na articulação eu desci lá o material o titular desculpa os 75 ml de destilado com uma solução de ácido clorídrico então tá aqui o ácido clorídrico é bem importante observar a concentração desse assunto que vai fazer parte no palco depois coloquei esse ar podendo observar que eu fiz eu serei a mureta ou seja a parte inferior do livro está tocando certa beleza e aí vai fazer uma situação colocando sempre ali dentro do elenco qual é o momento que não que eu paro de

titular quando essa verde e vermelho novamente pensando aqui eu não sei quanto foi devido a essa mulher cuidar de tudo eu observar quando mudou de cor fecha dureza e eu adoto por exemplo se lá tivesse ficado virado ficado de verde para vermelho eu observar o volume que gastei ó 0 05 ml 06 07 ml isso vai ser importante porque pra cá para o cálculo cálculos em que eu vou obter o percentual de proteína bruta eu vou colocar o bea eu gostaria que você observar seu fiel ver a naná forma o volume gasto na titulação esse

volume que eu mostrei pra vocês 07 - o bebê quem é o bebê o roaming pra eu não havia mencionado pra vocês é que enquanto eu faço peças famosas de um papelzinho moto dentro do tubo e dentro de uma pedra coloquei 50 isso mostra o que mostra em branco o papel coloque dentro bota 5 ml de ácido sulfúrico e todo o processo de gestão a legislação e vou fazer a articulação porque a quantidade de nitrogênio a gente que eu tenho escolar depois no carro nossa olha qual observa comigo o volume da amostra - o volume

nem pra rolar em branco vai dar um volume na articulação de pequenino que eu tenho que discordar aí você observe que às vezes vêem quem é se ele é a normalidade do ácido clorídrico que eu coloquei a situação nesse caso seria 6 mollá eu colocarei aqui na tabela vezes um ele e que m equivalente a grama do nitrogênio que segundo a tabelinha mil equivalente do nitrogênio é zero para 0 14 então nessa forma eu vou botar 0 a 0 14 então aqui o volume da amostra - o volume branco vezes no caso seis vezes é

20 14 vezes e 6 vezes o fator de correção esse fator de correção são fatores tabelados por exemplo para cada amostra se eu vou quantificar a proteína em arroz de 5,95 ser qualquer outro tipo de alimento diferente de arroz e trigo que é alguns dos alimentos que estão tabelados vai ser 6 e 25 essa tabela normalmente o método vai trazer quando eu precisava que o método fosse bem claros extinto pra vocês eu não quis colocar esse fator de correção mas na internet em qualquer método vai trazer esses fatores quando foi incluído no simples fora tudo

isso vamos ficar em cima e divido pelo p quem eu tenho o peso da mostra sobre você observar o que eu pensei em uma rosa essa roça eu tenho que anotar seu valor reprisando é a mostra tem que botar valor começa considerado neste momento pessoal olha quanto eu coloco esse teor de nitrogênio os valores da titulação dentro principal eu tô convertendo o teor de nitrogênio dessa nossa entrada de proteína por que ele pisa conversando com ninguém e parentes dentro gente a 0 21 14 e ele fatores começando a troca de coleção estava relacionada teor de

nitrogênio existe nas avenidas seis envolvem cinco é uma relação que eu quero dele se / 16 a 65 porque 16 porque normalmente as proteínas em torno de 16% de nitrogênio então é uma forma de converter nitrogênio é interino o objetivo dessa a cunhada dessa simulação de vocês um tempo um pouco os procedimentos da contratação de proteína espero que vocês possam modificar a fazer na vida de vocês possam tá trabalhando não sei se você já acabaram eu vou trabalhar no laboratório de bromatologia de análise físico química de alimentos mas é uma pequena amostra de como esse

processo de ler essa esse método e principalmente mostrar todas as ligações que às vezes é tão difícil a gente entender o que está acontecendo entre uma etapa e outra fica meu abraço de um até breve