Microbiologia: Aula 4 - Microscopia óptica simples

E aí meus queridos amigos e amigas que acompanham escola de ciências da vida pelo facebook e pelo YouTube Beleza pura com todos vocês na nossa quarta aula do curso de microbiologia ainda falando de microscopia vamos entrar na parte de microscopia óptica simples na aula anterior a gente definiu os variados tipos de microscopia que nós temos né detalhamos Um pouquinho como é o processo agora a gente vai entrar especificamente em cada tipo de microscopia começando pela microscopia óptica simples então nessa aula especial eu vou falar para vocês o que que é o microscópio óptico a definição

propriamente dita dele Quais são os principais componentes do microscópio óptico vou mostrar para vocês como se calcula a resolução e o detalhamento de uma imagem que é visualizada no microscópio óptico e por fim vou mostrar a mensuração da potência das lentes de que maneira a gente pode medir a potência das lentes para poder obter um resultado de resolução da nossa amostra que nós estamos avaliando Beleza então vamos começar aqui com a parte de definição básica de que o microscópio óptico composto é utilizado para visualização de estruturas celulares e teciduais por intermédio Da ampliação da Luz

refletida pela amostra em análise então o microscópio óptico composto nada mais é do que o microscópio óptico simples aquele que a gente comumentemente utiliza em laboratórios de histologia e microbiologia para poder analisar as nossas amostras como a grande maioria das células e tecidos t em torno de 1 a 100 micrm dá para se utilizar muito bem o microscópio óptico composto para poder visualizar as suas estruturas obviamente não com tantos detalhes quanto a microscopia eletrônica mas a gente consegue ter uma certa quantidade de detalhes que muitas vezes são extremamente importantes para diagnosticar por exemplo alguns tipos

de bactérias fungos protozoários e também avaliar outros tipos de tecidos né que aqui no caso não é enfoque da microbiologia mas o microscópio óptico também serve para este fim e quando a gente fala da composição estrutural do microscópio óptico composto a gente vê que os principais componentes desse microscópios são ou iluminador que é a nossa fonte de luz para poder iluminar a amostra um condensador que vai condensar essa luz especificamente num ponto da amostra pra gente poder avaliar as lentes ob que vão ampliar a imagem e também as lentes oculares que vão fornecer uma potência

ainda maior pra visualização das imagens né a imagem que é refletida para os nossos olhos é observada através das lentes oculares então pra gente ter uma noção melhor da estrutura de um microscópio óptico essa figura aqui mostra pra gente um microscópio óptico na íntegra tá aquelas partes que eu falei para vocês obviamente são partes principais mas existem outras partes também que eu vou citar para vocês já já então primeiro de tudo a nossa amostra quando a gente quer avaliar no microscópio óptico ela fica exatamente neste ponto que é a interface aqui do condensador com a

lente objetiva Então ela fica exatamente aqui então cada ponto do microscópio tem uma razão então como eu falei para vocês logo aqui nessa porção bioc Aqui nós temos as lentes oculares que é aonde a luz vai ser Projetada para os nossos olhos nós temos as lentes objetivas como eu falei para vocês nós temos um conjunto de lentes objetivas que conferem diferentes graus de resolução da nossa amostra nós temos o condensador então aqui dentro do condensador nós temos um conjunto de lentes que vão focalizar a luz na nossa amostra e obviamente nós temos também o iluminador

esse iluminador a luz que é emitida por ele pode ser controlada através deste ajustador de luz então você consegue aumentar ou diminuir a intens idade da luz que vai até a amostra em questão isso pode variar para cada tipo de amostra para você conseguir enxergar um detalhe ou outro Às vezes tem que aumentar a quantidade de luz ou diminuir tudo isso varia bastante nós temos aqui então também os parafusos para focalizar a nossa amostra temos o parafuso macr mecro que é para fazer a focalização aqui da nossa amostra grosseira né uma focalização grosseira que vai

mexer aqui o suporte para a estrutura da Nossa amostra Então esse quadrado Preto aqui é um suporte onde vai ficar a nossa amostra e a gente consegue abaixar ou Subir ele esse parafuso macromex então é para fazer um ajuste grosseiro e o parafuso micrométrico é para fazer o ajuste fino Primeiro de tudo a gente sempre faz um ajuste grosseiro na menor resolução possível E aí depois a gente faz os ajustes finos de acordo com as outras resoluções e obviamente a luz ela vai fazer todo um trajeto né E ela tem que passar aqui pelo corpo

do microscópio para chegar até as lentes oculares na qual nós iremos observar a nossa amostra falando na luz ela tem que obviamente incidir na amostra e as lentes objetivas tem que captar essa luz para emitir elas até as lentes oculares para chegar nos nossos olhos então a luz ela tem um trajeto especial no microscópio óptico composto Então vamos colocar aqui um microscópio óptico composto um desenho bem simples e vamos colocar aqui o trajeto da luz então o que que nós temos nós temos aqui então a nossa luz esse feixe azul aqui é o caminho que

a Luz está percorrendo primeiro de tudo ela vai sair do nosso iluminador então ele vai gerar essa fonte de luz a luz vai percorrer por duas lentes condensadoras ou os condensadores aqui e aí ela vai focalizar exatamente na nossa amostra focalizando na amostra as lentes objetivas vão captar essa luz e transmitir elas até um prisma esse Prisma ele vai refletir a luz para fazer com que ele tenha um desvio para que vá até a lente ocular da lente ocular nós temos mais um aumento da imagem para a linha de visão então é aqui neste ponto

que nós vamos enxergar a amostra veja que como nós temos lentes que vão ampliar a visualização aqui a resolução da nossa amostra nós temos a capacidade de enxergar estruturas mais detalhadas da nossa amostra se comparados a estrutura de detalhamento da amostra se observada pelo olho nu beleza bom e aí a gente pode ter algumas imagens né que a gente observa no microscópio óptico eu trouxe para vocês aqui três imagens que a gente comumentemente observa na microbiologia né O primeiro quadro nós temos a imagem de alguns fungos bactérias no segundo quadro e protozoários no caso o

último aí a giardia veja que essas estruturas nós não conseguimos enxergar utilizando os nossos próprios olhos mas quando se utiliza o microscópio óptico pode-se observar outras estruturas veja que nos fungos a gente vê vários filamentos aqui né no caso desse fungo as bactérias a gente consegue enxergar nitidamente que são cocos aqui e aqui a gente consegue nitidamente observar que é uma giardia né devido a sua estrutura ISO já tá descrito muito bem Então veja que nós temos um aumento de resolução e detalhamento da imagem utilizando microscópio óptico veja que nesse caso as três imagens elas

estão utilizando um corante por quê Porque é comum utilizar esses corantes nas amostras paraa visualização do microscópio óptico composto devido ao baixo contraste das amostras não coradas as amostras que são submetidas para a visualização do microscópio óptico composto elas são muito delgadas e devido a elas serem muito delgadas o contraste que elas fornecem para observação é muito baixo obviamente nós vamos falar em aulas posteriores de alguns microscópios que permitem a visualização de amostras não coradas Mas neste caso em especial é importante corar a amostra para aumentar o contraste dela para poder visualizar suas estruturas e

identificar o que que é a amostra que nós estamos avaliando Beleza agora falando especificamente da parte de resolução e detalhe da imagem O que que significa resolução a resolução nada mais é do que a capacidade de diferenciação de dois pontos que apresentam um uma distância específica pra gente explicar melhor isso daí vamos dar um exemplo aqui de dois pontos e esses dois pontos tem uma distância de dois micrômetros entre eles e aí a gente quer avaliar esses dois pontos em dois microscópios com diferentes capacidades de resolução se a gente avaliar por exemplo esses dois pontos

num microscópio que tem uma resolução de 1 micrômetro uma resolução ele consegue distinguir dois pontos entre si de uma distância de até 1 micrômetro se a gente olhar esses dois pontos pontos a gente consegue ver nitidamente eles separados Ok porque a resolução deste microscópio é maior do que a distância entre esses dois pontos se esses dois pontos tivessem 1 micrm de distância entre eles nós também conseguiríamos observar eles nitidamente separados agora se nós utilizarmos um microscópio que tem uma resolução máxima de 4 micrm se nós observássemos esses dois pontos neste microscópio nós iríamos enxergar apenas

um único ponto porque a distância entre eles é de 2 micrm e esse microscópio não consegue distinguir pontos que possuem uma distância menor do que 4 micrm então isso é extremamente importante quando nós estudamos A microscopia óptica e uma coisa muito legal é que quanto maior a resolução melhor é a capacidade de distinguir os detalhes da Imagem e existe uma maneira né um cálculo que nós utilizamos para a resolução utilizando microscópio óptico que é este cálculo aqui o que que significa cada ponto deste cálculo bom o r é resolução Esse 0,61 é uma constante a

letra grega lambda é o comprimento de onda da luz que geralmente ele varia entre 04 E 0,7 micrm então fixa-se esse valor geralmente em 0,5 micrm a letra grega Eta representa o índice de refração que a luz vai sofrer quando passar pela m amostra então o ar ele tem o índice de refração igual a um E se nós utilizarmos um óleo de dimensão que é para poder visualizar melhor a amostra ele apresenta um índice de refração de 1.4 e o seno de Alfa nada mais é do que o seno do ângulo do cone de luz

que é formado no momento que ele incide na amostra normalmente utiliza-se a lente objetiva em relação à amostra num ângulo de 90º então num ângulo de 90º fazendo o cálculo a gente consegue ver que o seno de um ângulo de 90º corresponde a 1 então a gente pode substituir os valores aí nessa fórmula e chega num valor de resolução máximo de 0,22 micrm então utilizando o microscópio óptico composto de luz nós temos uma resolução máxima de 0,22 micrm não é possível atualmente chegar em resoluções menores do que essa utilizando no microscópio óptico composto visto que

nós dependemos muito do comprimento de onda certo e os índices de refração eles não costumam passar de 1,4 então questão de resolução utilizando o microscópio óptico composto é no máximo 0,22 micrm mas isso não significa que nós podemos utilizar resoluções maiores em muitas ocasiões não é necessário utilizar uma resolução tão grande para isso nós temos diferentes potências das lentes que são utilizadas nos microscópios ópticos né e a gente pode fazer um cálculo paraa mensuração da potência de resolução de um microscópio óptico que é essa daí o que que significa cada um desses termos bom o

PT significa potência Total PL que é a potência da lente ocular geralmente a lente ocular ela já vem com um valor fixado de potência ela consegue ampliar 10 vezes o tamanho da amostra e o plb significa potência da lente objetiva que pode ter diferentes potências que vai de 4 10 40 e 100 vezes então se nós quisermos observar uma amostra com mais detalhes nós variamos a lente objetiva na qual nós estamos fazendo a leitura da nossa amostra se a gente quer mais detalhes a gente utiliza uma lente com maior potência se a gente quer menos

detalhes nós utilizamos uma lente com menor potência em muitas ocasiões utiliza-se as lentes para observar as amostras entre 10 e 40 vezes quatro vezes geralmente é para ter uma análise superficial da amostra que muitas vezes confere algumas informações interessantes sobre ela mas detalhes mais pequenos são geralmente observados entre 10 e 40 vezes no caso do aumento da lente objetiva de 100 vezes acaba-se utilizando um óleo de imersão por quê Porque a luz quando ela incide na lente objetiva de 100 vezes muitas vezes a luz que é transmitida ela é dispersa para o ambiente devido ao

índice de refração do ar para aumentar esse índice de refração da luz utiliza-se o óleo de imersão que é a única maneira de poder se observar as amostras ampliadas em 100 vezes utilizando a lente objetivo e obviamente nós sempre temos que calcular multiplicando como eu mostrei para vocês os os valores da lente ocular vezes a lente objetiva beleza bom Essas foram as referências que eu utilizei para essa aula eu espero definitivamente que vocês tenham gostado se vocês gostaram deem joinha me ajudem a compartilhar o vídeo quanto mais vocês fizerem isso mais o YouTube me enxerga

mais pessoas são beneficiadas aqui com a escola de ciências da vida e se vocês quiserem participar se inscrevam aqui no canal do YouTube e participem lá do grupo da página da escola de ciências da vida no Facebook tem o meu Facebook particular se vocês quiserem me adicionar também pode como sempre todas as informações estão aqui no descritivo deste vídeo Beleza então é isso aí pessoal forte abraço a todos fiquem com Deus e até o próximo vídeo se Deus quiser