S02_V05 - Interferentes no método espectrofotométrico

o aspecto fotometria é um método fantástico bastante utilizado no laboratório clínico entretanto este método está sujeito a ação de alguns interferentes e ai molise é um dos principais interferentes no método espectrofotométrico é moles e diz respeito à análise de eritrócitos então quando a márcia sofre elise ela libera o seu conteúdo e entra célula e todos sabem que a hemoglobina é uma das principais proteínas da hemácia então essa é a hemoglobina é um pigmento de cor vermelha né e é por isso que o soro hemolisado adquire essa coloração vermelha a hemoglobina ela absorve luz na faixa

de 450 números o e invisto de peixe fenômeno a hemoglobina pode causar uma interferência espectral então se o meu analito de interesse eu quero medir né se o meu método tá eu ajustei o comprimento de onda para 450 por exemplo ou próximo disso uma mostra imobilizada ela pode levar e pode aumentar e forma falsa essa absorbância e 450 em virtude dessa concentração elevada de hemoglobina e aí e além de hemoglobina outras outras moléculas né são encontradas em abundância no interior das hemácias como por exemplo as enzimas lactato-desidrogenase e aspartato aminotransferase ldh ea st assim como

o potássio também é encontrado em abundância a no interior das hemácias como no interior da maioria das células então quando a as hemácias sofrem lins elas também liberam esses analitos em grande quantidade liberam para o quase então isso provoca um aumento considerável na concentração plasmática desses analitos então muitas vezes a esses analitos estão sendo justamente medidos nas amostras a com interesse clínico ok então se a mostra taí humanizada a morte é essa mostra e vai ter um falso aumento nas concentrações de ldh dst ou de potássio por exemplo esses são os principais os que são

mais afetados pela imóveis ok é um outro interferente como no método espectrofotométrico é a hiperbilirrubinemia três estão uma série de condições que podem levar a um aumento na concentração de bilirrubina e no sangue do paciente vamos lá várias patologias que podem levar isso então dependendo do nível de bilirrubina no soro ok e é isso a gente pode perceber isso visualmente porque o choro ele adquire uma coloração mais amarelada o amarelo mais intenso então essa bilirrubina também é um outro pigmento que absorve luz na faixa do visível tá e também em torno de 450 nanômetro ok

então da mesma forma que a hemoglobina a hiperbilirrubinemia também pode causar uma interferência espectral e o outro interferente comum na rotina do laboratório é a lipemia então ali premia ela e é caracterizado como um aumento na concentração de quilômetros quilomícrons é uma lipoproteína seja uma partícula e cuja função é transportar lipídios principalmente triglicerídios então esse aumento na concentração de quilomícrons ele surgem pode surgir principalmente em decorrência de duas situações uma situação patológica que a dislipidemia ok então alguns indivíduos eles têm essa concentração aumentada de quilomícrons e a outra situação quem é e o jejum e

inadequada então depois de uma refeição principalmente uma refeição rica em gordura tão aí algo em torno de 1 a 2 horas depois da refeição o soro do paciente ele adquire esse aspecto leitoso característico do soro lipemico oi e aí o que que acontece a gente já sabe que a espectrofotometria utilizadas da química clínica a porque a gente utiliza principalmente a faixa de comprimento de onda do visível que vai entre 300 e 700 nanometros mais ou menos bom e o que acontece aqui o diâmetro da essas partículas né de quilomícron eles vai o diâmetro varia aí

de cem a mil nanômetros não seja há uma sobreposição entre o tamanho nos quilômetros com a faixa de comprimento de onda utilizado na química química então é visto disso a gente pode ter o fenômeno da dispersão de luz ok então as partículas de quilomícrons representada aqui nessa mostra de baixo que seriam um soro lipemico então a elas a luz incidente que deveria atravessar naturalmente amostra ela acaba batendo nas partículas de quilomícrons e sofrendo dispersão ou seja fazendo com que essa luz tá que deveria naturalmente chegar o detector ela acaba não chegando no detector em decorrência

da concentração elevada de quilomícron da amostra o ok então como resultado do soro lipemico e o amostra lipemica a gente tem que quanto maior for essa lipemia nem nova e será transmitância em ok e consequentemente maior vai ser a absorbância medida neste espectrofotômetro lembrando que esse aumento na absorbância ele não é decorrência do aumento na concentração da minha molécula de interesse que eu estou medindo e sim o aumento no absorbância se dá em virtude do efeito dos quilômetros em dispersar a luz que está incidindo na amostra