#1A HPLC-ESI-MS - Aula Espectrometria de Massas - Electrospray - Single Quadrupolo

como funciona o espectrômetro de massas single quadrupolo com fonte de realização elétrons porém este é o tópico a ser discutido nesta animação 3d de espectrometria de massas não há dúvidas de que o espectrômetro de massas é uma das técnicas analíticas mais importantes hoje há no mercado diversos tipos de equipamentos sendo modelo baseado em fontes utilização elétrons premiê analisador do tipo quadrupolo um dos mais presentes em laboratórios a fonte de uns elétrons play possui elevada relevância pois é uma das mais adequadas para trabalhos envolvendo amostras em fase líquida como na determinação de espécies não voláteis e

termicamente instáveis por isso equipamentos com elétrons por aí são os modelos mais comumente acoplados com métodos de separação e fase líquida como hplc rua hplc e eletroforese capilar para tratar desta técnica irei utilizar este equipamento apresentado modificando então segundo andamento do curso como vocês podem ver para facilitar a visualização dos componentes e também o entendimento da técnica o equipamento é apresentado sem a sua carcaça externa e também sem as tampas metálicas dos compartimentos do seu interior a spectrum entre de massas se baseia na separação e detecção de ambos em fase gasosa sendo o processo de

separação realizada em função da relação mas a carga das espécies aqui reside o primeiro problema e se detectar espécie em fase líquida e portanto no acoplamento de 1h plc ou de um eletroforese capilar a um espectrômetro de massas enquanto no detector vive uma fase líquida pode ser direcionada diretamente ao detector em espectrometria de massas há de se converter para e 11 em fase gasosa as espécies contidas na fase líquida um dos métodos mais utilizados para levar a espécie em fase líquida para fazer gasosa na forma de íons é denominado de organização por elétrons foi para

se trabalhar com elétrons pré o tubo transportando o líquido que se deseja analisar é conectado a um eletrodo na forma de uma sonda metallica entre esta sonda e entrada do espectrômetro de massas nesse caso o conteúdo é estabelecido um alto potencial elétrico da ordem de 2 a 5 mil volts o resultado então um spray um aerossol de gotículas eletricamente carregadas se deslocando do tubo de saída de elétrons frei até orifício de entrada do espectrômetro de massas um fluxo de nitrogênio costuma também ser utilizado nesse tipo de fonte e visa facilitar a secagem do spray informado

nesse sentido quando inicia-se o trabalho com esse tipo de sistema há de se ajustar o fluxo de gás auxiliar a composição e invasão da fazenda guida é o potencial utilizado na fonte de um seleto spray caso a justiça não seja realizado corretamente o spray poderá não permanecer estável ea determinação como um todo estará comprometida como exemplo apresento a vocês uma imagem obtida de um software de um espectrômetro de massas nessa imagem pode se notar que em uma das telas do software de controle alguns dos parâmetros mencionados podem ser ajustados pelo analista segundo necessidade além dos

parâmetros já citados ver se nessa tela que é possível também o ajuste de temperatura de um segundo gás este é utilizado é transparente com a função de secagem do spray informado então a formação de ambos em fase gasosa nesse sistema se deve a vários fatores durante elétrons play eletrônicos ocorre nos eletrodos é um tipo de cone com excesso de cargas é formado na ponta da sonda por onde o líquido sai é de silicone que são injetadas as gotículas carregadas que compõem o spray assim utilizando esse potencial positivo na sonda as gotículas rejeitadas apresentaram carga positiva

portanto íons com cargas positivas serão formados obviamente o oposto ocorre quando o potencial na sonda negativo o que iríamos com cargas negativas são formados nesta segunda condição enquanto as gotículas carregadas se direcionar o espectrômetro de massas estas são parcialmente secas pelo gás auxiliar introduzido na sonda e também pelo segundo o fluxo de nitrogênio aquecido vindo da região próxima à entrada do espectrômetro após esse processo de secagem as partículas carregadas podem passar por um pequeno orifício como por exemplo um capilar de vidro aquecido e adentrar uma região de pressão reduzida no interior do espectrômetro de massas

como visto a fonte de uns elétrons play atua em pressão atmosférica após entrada no espectrômetro de massas porém uma bomba de vácuo é utilizada para a redução da pressão a bomba então na remoção de espécies neutras provenientes da secagem do spray sendo esta ligado o espectrômetro por meio de um tubo um dos mecanismos propostos para a formação de 1 100 fase gasosa elétrons por aí se dá durante o processo de secagem com a redução do tamanho das gotículas carregadas com a redução do tamanho das partículas ocorre um acúmulo de cargas as gotículas acaba então por

colapsar produzindo gotículas carregadas cada vez menores até que iríamos das espécies de interesse sejam formados uma característica muito importante do elétrons play e que se reflete no espectro de massas obtido de uma análise é que esta fonte de anos normalmente não fragmenta as espécies em estudo o comum é que os formados sejam apenas a espécie que me que em estudo somada ou subtraída de um ou múltiplos prótons para muitas espécies algo parecido com equilíbrio base ênfase à cosa é preciso citar também que dependendo da estrutura da espécie em estudo é das condições experimentais utilizadas poderão

ser visualizados também agregados com algum outro componente presente na fase líquida onde se encontra o hálito como agregado com o sódio potássio cloreto ou algum outro iam em resumo diversos erros podem ser formados pelo elétrons prêmio mas o processo de fragmentação em si exceto em algumas condições específicas é pouco comum já com as espécies na forma de e ênfase gás osi na região do espectrômetro de pressão reduzida é comum o uso de alguns dispositivos para aumentar a transferência dos íons para as sessões subseqüentes do equipamento os equipamentos disponíveis utilizam lentes eletrostáticas octa pólos ou e

psa pólos para a realização desta tarefa então é apenas após os guias eletrostáticos que os viam são direcionados até uma seção do espectrômetro destinada a separação das espécies ou seja o analisador de massas e uns podem ser acelerados ou ter sua trajetória alterada o exemplo por um campo elétrico a influência causada nos 11 anos é fortemente dependente da intensidade do campo aplicado um outro fator deste processo é que iríamos com relação a essa carga diferente são influenciados diferentemente com base nessas propriedades espectrômetro de massas promovem a manipulação de íons em fase gasosa a ponto de

conseguir que um dado e onde certa mas a carga seja detectado separadamente dos outros no espectrômetro do tipo quadrupolo todos os presentes são acelerados por entre as lentes em direção a um detector apropriado capaz de apresentar um sinal elétrico proporcional à quantidade de uns que o atingir porém entre ponta após as lentes e o detector os íons passam por entre um conjunto de quatro pólos na forma de barras metálicas este então o quadro pólo onde uma espécie de dança dos íons ocorre em seu interior neste equipamento apresentado apenas um quadro pólo é utilizado sendo por

este motivo denominado the single quadrupolo ou apenas massas do tipo quadrupolo a idéia nesse dispositivo é que as barras metálicas sejam divididas em paris opostos um potencial constante sobreposto um sinal de alta freqüência então estabelecido entre cada par de barras ajustando-se à freqüência o sinal e os potenciais aplicados em cada par de barras é possível desestabilizar a trajetória de íons indesejados e impedir que estes continuem o percurso até o detector apesar da trajetória dos cios nesta animação não refletir exatamente uma condição real a ideia é mostrar que utilizando parâmetros adequados apenas iam de uma determinada

relação a essa carga selecionadas serão detectados as demais espécies serão descarregadas sobre as barras metálicas do quadro pólo para que uns com relação mas a carga diferentes sejam detectados basta que se altere a freqüência do sinal elétrico e o potencial de ser sobre o quadro pólo como exemplo o equipamento pode ser ajustado para detecção de íons de uma determinada massa carga e após um certo tempo suficiente para que estes iam sejam monitorados pode alterar a condição do espectrômetro para que novos iam sejam detectados fazendo isso é possível realizar um escândalo seus presentes em pilotar um

espectro de massas com a intensidade ou a abundância de cada um detector os equipamentos disponíveis no mercado hoje permitem que medidas no modo scan sejam realizadas em uma ampla faixa de massa carga e escala de tempo de poucos milissegundos uma característica adicional de qualquer tipo de petróleo de massas é que um em fase gasosa pode colidir com espécies presentes no gás em seu percurso caso isso ocorra a separação pode ser comprometida pelo alargamento da banda onde estão contidos iam sou mesmo por processo de fragmentação devido a isso todo o sistema contendo as lentes vitor de

massas e detector é confinado no interior de uma câmera conectado a um sistema para redução da pressão além da bomba mecânica em uma etapa inicial do espectrômetro de massas adiciona-se uma segunda etapa mais uma ou duas bombas de alto vácuo capaz de reduzir a níveis ao redor de 10 a menos cinco thor a pressão no interior do equipamento esse fator possui tanto impor a tam se o espectrômetro de massas que todos os equipamentos disponíveis no mercado apresentam continuamente em seus softwares a pressão em que o sistema está trabalhando se qualquer valor de pressão acima do

estipulado pelo fabricante é registrado o software informa o jornalista e bloqueio o uso do equipamento até que a pressão volte a valores adequados para a detecção um outro detalhe acerca do espectrômetro de massas diz respeito à manutenção do equipamento é muito comum o acúmulo de sujeira em sua entrada principalmente quando se trabalha com amostras complexas quando o equipamento encontra-se com excesso de material depositado em suas partes são observados erros durante a detecção de certos íons e perda de sensibilidade para limpeza dos componentes externos da fonte de íons é comum que apenas se interrompam as análises

já para a remoção e limpeza do capilar de entrada do espectrômetro absurda maioria dos equipamentos requer que as bombas de vácuo sejam desligadas nesse sentido deve se realizar o processo de desligamento via software jamais desligar o espectrômetro diretamente pelo botão on off desligado o equipamento por software a bomba de alto vácuo será desligada progressivamente apenas após a pressão ter atingido um certo valor acima do determinado pelo fabricante é que a bomba mecânica será desligada esse procedimento evita a entrada de grande quantidade de ar enquanto a bomba de alto vácuo estiver em funcionamento e previne possíveis

danos a este equipamento por último ainda com relação à manutenção do sistema e sua correta operação após algum tempo de uso é comum que seja necessário a troca do capilar de entrada no espectrômetro e do óleo da bomba mecânica além de rotineiramente ser preciso também checagem visual da integridade destes esta só então algumas características do equipamento com fonte de realização de transplante e analisador do tipo single quadrupolo na próxima aula tratar do processo de calibração acoplamento hplc e da interpretação de espectros e cromatografia obtidos para algumas condições de análise espero que vocês tenham gostado desta

aula e que assistam a continuação deste vídeo sugestões dúvidas e críticas construtivas são bem vindas por favor deixem seus comentários