[Música] o departamento de DST aides e hepatites virais do Ministério da Saúde estabelece fluxogramas para o diagnóstico da infecção pelo HIV utilizando testes rápidos conforme determina a portaria número 29 de 17 de dezembro de 2013 quando um primeiro teste rápido tem resultado reagente é necessária a realização de um segundo teste rápido para confirmação do diagnóstico independente do fabricante da metodologia ou da composição antigênica os kits fornecidos pelo Ministério da Saúde São igualmente capazes de detectar anticorpos anti hiv1 incluindo o grupo O e anticorpos anti hiv2 um desses testes rápidos é o ensaio imunocromatográfico de fluxo
lateral HIV abon ele permite o resultado em no máximo 20 minutos e mais pode ser realizado em local sem infraestrutura Laboratorial o departamento de DST aides e hepatites virais do Ministério da Saúde já oferece a versão desse teste que utiliza amostras de sangue Total obtidas por punção digital ou venosa e também com soro ou plasma atenção o material para execução dos Testes vem em kits que devem ser estocados em uma temperatura entre 2 e 30º C mas lembre-se em locais em que a temperatura ambiente estiver fora da faixa indicada pelo fabricante os kits devem ser
guardados em caixas térmicas veja agora como funciona o teste rápido de imunocromatografia de fluxo lateral HIV abon nesse teste o dispositivo tem um local para a adição da amostra e do tampão que chamaremos poço existe também uma janela de leitura que contém os seguintes caracteres C T1 e T2 a letra C refere-se à área de controle os caracteres T1 e T2 referencia a área do teste no teste rápido HIV abon a fase sólida do dispositivo é constituída por uma membrana de nitrocelulose na qual estão fixados antígenos do hiv1 e do hiv2 ligados a partículas coloridas
formando um conjugado nessa membrana há também imobilizados na área de teste 1 antígenos de captura hiv1 imobilizados na área de teste 2 existem antígenos de captura hiv2 sobre essa membrana no poço serão aplicados a amostra e o tampão que migrarão para a janela de leitura a área de controle C correspond onde a área de controle processual do teste quando a amostra é aplicada sobre a membrana se houver a presença de anticorpos antih eles se ligam ao conjugado com a adição do tampão o complexo conjugado anticorpo migra ao longo da membrana na área de teste se
houver anticorpos anti hiv1 na amostra uma linha visível é formada na região T1 do dispositivo se os anticorpos da amostra for anti hiv2 uma linha visível é formada na região T2 a amostra continua a migrar até a área de controle onde aparecerá uma linha colorida indicando que o teste funcionou corretamente e é válido Observe que o teste Hi abon permite diferenciar os anticorpos anti H1 dos anticorpos anti hiv2 veja agora como executar o teste rápido HIV abom pense sempre na sua segurança utilize equipamentos de proteção individual Você vai precisar de uma superfície plana e livre
de vibração para utilizar como local de trabalho forre a com material absorvente antes de utilizar um kit confira sempre o prazo de validade no kit você encontra o manual de instruções tubos capilares e envelopes com dois compartimentos de tamanhos diferentes lacrados indiv o compartimento menor contém um dispositivo de teste pronto para uso e um sachê de sílica para absorver o excesso de umidade no ambiente do envelope o compartimento maior contém solução tampão de uso único lanceta estéreo e Leno umedecido com álcool além dos componentes fornecidos pelo fabricante Você vai precisar de um cronômetro ou relógio
para marcar os tempos da reação antes de começar o teste separe o material que você vai utilizar inclusive o tubo capilar para coleta da amostra de sangue por punção digital Abra o compartimento Menor Do envelope laminado retire o dispositivo de teste verifique se o dispositivo está íntegro faça a identificação do dispositivo com o nome as iniciais ou número do indivíduo em seguida Abra o compartimento maior do envelope e retire o frasco de solução tampão a lanceta estéreo e o lenço umedecido com álcool gire e remova a aba do frasco de solução tampão sem apertar a
seguir coloque o frasco Numa superfície limpa e plana da área de trabalho para fazer a coleta da amostra de sangue por punção digital Se necessário peça ao indivíduo para lavar e secar as mãos para coletar a amostra escolha o dedo médio o anelar ou indicador priorizando o que não tiver ferido ou calos se a mão da pessoa estiver muito fria peç que friccione as mãos ou faça massagem suavemente para aquecê-las segure a mão do indivíduo com o lado da Palma para cima pressione levemente a mão ordenhando no sentido do Punho para o dedo onde será
feita a punção faça a antissepsia do local da punção Com um único movimento deixe o álcool secar completamente retire a tampa posicione a lanceta na parte lateral da polpa do dedo e pressione contra o dedo para fazer a punção despreze a lanceta repetindo escolha o dedo faça antissepsia em um único movimento perfure o dedo e descarte a lanceta para coletar o sangue segure o tubo capilar abaixo do bobbo na posição horizontal sem cobrir a marca preta indicadora do volume de amostra não toque ou Aperte o bobo coloque a extremidade aberta do tubo capilar na gota
de sangue e deixe que o sangue suba por capilaridade até a marca preta Evite a formação de bolhas Aperte o bobo cobrindo os dois orifícios de ar e dispense todo o volume que é de 50 microl no poço em seguida você vai dispensar duas gotas do tampão no mesmo poço no qual você dispensou a amostra mantendo o frasco na vertical para evitar a formação de bolhas veja bem a solução tampão é individual para cada teste que for realizar Portanto o que sobrar no frasco deve ser desprezado a seguir veja como fazer a leitura e a
Interpretação dos resultados do HIV abon no teste HIV abon você pode fazer a leitura entre 10 e 20 minutos após a adição do tampão atenção depois desse período de 20 minutos os testes podem apresentar resultados falsos positivos portanto faça a leitura e a Interpretação do teste em no máximo 20 minutos Leia no seu manual telelab as implicações de leituras tardias nos resultados dos Testes no teste rápido HIV abon Se aparecer uma linha colorida somente na área de controle a amostra é considerada não reagente Se aparecer uma linha colorida na área de controle e na de
teste 1 amostra é considerada reagente para hiv1 se aparecer uma linha colorida na área de controle e na linha de teste 2 a amostra considerada reagente para hiv2 atenção a infecção pelo hiv2 é bastante Rara no Brasil a dupla infecção pelo hiv1 e hiv2 em um mesmo indivíduo é mais rara ainda por isso quando for observada a presença de reatividade nas duas linhas do teste HIV abon é muito provável que esteja havendo reatividade cruzada vejem se o manual telelab os motivos possíveis para o teste rápido apresentar reatividade nas duas linhas e como deve ser feita
a investigação suplementar desses casos note bem Qualquer teste só será válido se houver uma linha colorida na área de controle se essa linha não aparecer repita o teste com um novo dispositivo conforme as orientações do manual técnico para o diagnóstico da infecção pelo HIV aprovado pela portaria 29 de 17 de dezembro de 2013 atenção a ocorrência de resultados Inválidos tem de ser informada ao serviço de atendimento ao cliente da empresa e também ao departamento de DST aides e hepatites virais do Ministério da Saúde Você acaba de ver como executar ler e interpretar o HIV abom
consulte a bibliografia de apoio telelab para obter informações detalhadas e recomendações sobre a execução leitura e interpretação dos Testes Leia Todo o material e estude com atenção [Música] C m