Microbiologia: Aula 8 - Microscopia confocal

E aí meus queridos amigos Beleza pura com todos vocês na nossa oitava aula do curso de microbiologia ainda falando de microscopia vamos falar sobre microscopia com focal essa aula vai ser bem rapidinha porque muitos dos conceitos que a gente vai usar nessa aula a gente acabou utilizando na aula passada então sugiro que você assista a microscopia de fluorescência para entender melhor a aula de microscopia com focal então especificamente nessa aula eu vou mostrar os conceitos Gerais de uso da microscopia com focal né como é que ela é e como é que ela funciona mostrar os

os detalhes de funcionamento da técnica para fazer a visualização dos tecidos e células que a gente quer analisar e mostrar as aplicações do uso da microscopia com focal Beleza então aqui para começar a gente já viu nas aulas anteriores esses quatro tipos de microscopia óptica que é a microscopia óptica comum de Campo escuro de contraste de fase e de fluorescência cada qual tem uma propriedade específica pra gente tá analisando os tipos celulares que a gente quer só que uma coisa importante que a gente a gente tem que ver nesses quatro tipos de microscopia aqui a

focalização é de todos os planos ao mesmo tempo ou seja a gente vê uma única imagem e a gente não consegue modular o plano na qual nós estamos focalizando a nossa amostra Ou seja a gente sempre vai enxergar todas as estruturas em um único plano nós não conseguimos montar planos diferentes da nossa amostra que nós estamos avaliando para gerar uma imagem tridimensional e como vocês sabem todos os tipos de organismos eles são tridimensionais as nossas células por exemplo elas não são uma imagem chapada bidimensional e sim tridimensional então quando a gente olha nesses quatro tipos

de microscópio sempre vai faltar informações de espaço de profundidade da célula ou do tecido que a gente tá avaliando e muitas vezes isso é importante pra gente obter isso nós utilizamos a microscopia com focal que ela consegue fazer a focalização de um plano único específico então a gente consegue focalizar vários Planos só que um de cada vez e aí focalizando esses vários planos nós conseguimos montar uma estrutura tridimensional portanto a microscopia com focal permite ver detalhes de determinados planos de focalização da amostra se a gente pegar uma célula por exemplo e analisar naqueles quatro microscópios

como eu falei nós vamos ter uma estrutura bidimensional Mas se nós avaliarmos na microscopia com focal nós podemos ir montando esta célula por focalização em diferentes planos até chegarmos a num estrutura tridimensional ou bidimensional com maior quantidade de detalhes beleza e uma coisa importante é que a microscopia com focal ela é um segmento aperfeiçoado da microscopia de fluorescência por isso que eu falei que se vocês assistiram A aula anterior de microscopia de fluorescência vocês vão entender melhor essa aula porque utiliza-se os princípios da microscopia de fluorescência para se utilizar a microscopia com focal Beleza então

pra gente entender como funciona a microscopia com focal vamos dar uma olhadinha nos principais componentes do microscópio com focal que são esses aí que vocês estão observando basicamente ele é muito semelhante ao microscópio de fluorescência convencional porém no microscópio com focal nós temos aqui um divisor de feixes de luz que ele vai promover um efeito na luz para fazer vários feixes ao mesmo tempo que vão incidir em diferente pontos em diferentes planos da nossa amostra que nós estamos avaliando então a microscopia com focal se baseia na focalização específica de um plano da amostra por intermédio

da reflexão de um feixe de laser que é semelhante ao que a gente viu lá na microscopia de fluorescência então basicamente é isso daí essa figura ela explica para nós super bem como funciona um microscópio com focal então Aqui nós temos uma fonte de laser ok que vai emitir uma radiação de luz e Aqui nós temos o nosso divisor de feixes que ele tem uma abertura que vai permitir dividir esse feixe que é emitido por esse laser em até três feixes Tá OK pode ser mais pode ser menos mas a gente tem essa divisão de

feixes aqui e aí nós temos esse espelho de cromático né o espelho de ci que a gente já viu também na aula de microscopia de fluorescência que ele vai refletir a luz que é emitida por esse laser e ele reflete veja que como os feixes estão divididos eles vão refletir de diferentes maneiras aqui na nossa amostra como eles refletem de diferentes maneiras por decorrência aqui do ângulo que encontra-se esse espelho de Cico o espelho de cromático ele vai cedir em diferentes pontos e aí nós podemos obter uma imagem tridimensional como a gente pode obter essa

imagem ele vai incidir obviamente aqui a gente está emitindo uma luz vai absorver essa luz aqui como nós temos fluoróforos na nossa amostra vai absorver essa luz e vai emitir outra luz em outro comprimento de onda ela vai passar através desse espelho não vai ser refletida porque ela permite essa passagem e nós temos um detector que permite a focalização apenas de um plano se nós modulos aqui cada plano nós podemos focalizar planos diferentes no caso aqui a amostra ela está condicionada apenas para focalizar este plano este terceiro plano aqui e aí focaliza ele vai até

o detector E aí se a gente quer ter mais detalhes da nossa amostra a gente focaliza o próximo plano e assim por diante até obter uma imagem mais detalhada da amostra que a gente tá avaliando E aí se a gente for ver na microscopia de fluorescência a gente tem uma certa quantidade de detalhes que a gente consegue observar aqui por exemplo nos tecidos e microorganismos que a gente tá avaliando se a gente usa microscopia com focal olha só a quantidade de detalhes em relação a esta outra imagem aqui que nós temos a gente consegue notar

um pouco de profundidade e obviamente a gente consegue ver com mais detalhes a estrutura a gente vê que isso daqui tem certa profundidade Tá ok como é uma imagem bidimensional uma foto a gente não vai conseguir perceber isso aqui de maneira tridimensional porém é possível de utilizar técnicas de computadores para poder modular essa imagem e enxergar uma estrutura tridimensional então você pode rotacionar ela pode olhar ela por cima por baixo pelos lados que te dá uma quantidade de detalhes muito maior beleza e falando das aplicações como eu falei é obtenção de imagens biot tridimensionais das

células que permite maior detalhamento das estruturas muitas vezes a gente precisa ter a imagem tridimensional pra gente saber de que maneira determinado evento tá acontecendo naquela célula em questão e obviamente ela segue os mesmos princípios da microscopia de fluorescência a gente também pode avaliar células vivas ou mortas enfim né é mais interessante a gente avaliar células fixadas à mesmes assim a gente consegue ter um detalhamento bi ou tridimensional da célula que a gente tá avaliando Beleza então é isso aí essa foi a referência que eu utilizei aí para essa aula referência clássica de microbiologia uma

aula bem rapidinha espero que vocês tenham gostado se vocês gostaram por favor dá aquele joinha para ajudar a escola de ciências da vida se vocês ajudam a escola de ciências da vida obviamente vocês ajudam também outras pessoas a encontrarem aqui a escola de ciências da vida e serem beneficiados aqui Pelas nossas aulas e se vocês quiserem participar ficar parte de todas as nossas novidades se inscreve aqui no canal do YouTube yoube participa lá do grupo da página do Facebook da escola de ciências da vida tem o meu Facebook particular se você quiser me adicionar também

pode como sempre todas as informações estão aqui no descritivo desse vídeo beleza pessoal então é isso aí forte abraço a todos fiquem com Deus e até a próxima aula Se Deus quiser