Diagnóstico Laboratorial da Tuberculose - TRM-TB - correção

[Música] a tuberculose surpreendeu o mundo na década de 1980 quando os efeitos devastadores da epidemia da aides desencadearam o aumento do número de casos e da taxa de letalidade dessa doença nas pessoas vivendo com o HIV este problema persiste até os dias atuais no Brasil e no mundo após sem grandes Progressos no Cuidado da tuberculose nos últimos anos novas tecnologias estão sendo disponibilizadas para diagnóstico e terapêutica como os testes rápidos moleculares e novos fármacos específicos Além disso estão sendo testados esquemas de tratamento com menor duração além de novas vacinas alinhando-se à Organização Mundial de Saúde

o plano nacional pelo fim da tuberculose tem entre seus objetivos diagnosticar precocemente todas as formas de tb e para tanto é necessário fortalecer e ampliar o acesso à rede de Diagnóstico Laboratorial neste cenário o teste rápido molecular para Tuberculose trmb utilizando o sistema genexpert desenvolvido pela cfid foi introduzido na Rede Pública de saúde do Brasil em 2014 e está disponível em diversos municípios do país o trm TB detecta a presença do DNA de micobacterium tuberculoses MTB em amostras pulmonares e extrapulmonares também é capaz de detectar resistência dessa bactéria à rifampicina que é um dos principais

fármacos utilizados no tratamento da tb esse teste deve ser utilizado segundo algoritmos recomendados pelo Ministério da Saúde e oferece resultado em 2 horas a nova versão do sistema genexpert utiliza os cartuchos Ultra e apresenta sensibilidade de 990,9 e especificidade de 95,6 para pesquisa de MTB para a detecção de resistência a rifan piscina o teste apresenta sensibilidade de 94,9 e especificidade de 999,1 o trm TB utiliza a técnica de nested PCR em tempo real que é uma variação da reação em cadeia da polimerase PCR adicional desenvolvida para aumentar a sensibilidade e a especificidade do método é

baseado na extração Purificação amplificação e detecção de DNA por meio de um sistema de transferência de fluido integrado e fechado para tanto o método utiliza duas sondas para a identificação de fragmentos específicos de DNA do complexo e tuberculoses e quatro sondas para verificação de resistência dessa bactéria À rifan piscina possui ainda controle interno do desempenho do teste esse método é capaz de diagnosticar atb e detectar a resistência À rifan piscina em amostras que contenham pelo menos 16 unidades formadoras de colônias UFC de MTB por ml de escarro o sistema genexpert C Fade é composto pela

Unidade de processamento genexpert um computador um leitor de QR Code e opcionalmente uma impressora que também pode ser acoplada ao sistema é disponibilizado com 2 4 ou 16 módulos e cada módulo é capaz de processar uma amostra por vez os módulos operam de forma independente uns dos outros e portanto as amostras não precisam ser processadas simultaneamente o sistema utiliza cartuchos Expert MTB rif Ultra que já contém todos os reagentes para a PCR cada cartucho é utilizado para uma única amostra e não é reutilizável eliminando o risco de contaminação cruzada entre amostras o computador acoplado ao

sistema dispõe do software genexpert DX para a realização visualização análise e emissão dos resultados do teste o leitor faz o reconhecimento do car code que está na frente do Cartucho registra a amostra no sistema e com um sinal luminoso indica o módulo que será utilizado para o teste com o trm TB o tempo para a emissão do resultado após inserção do Cartucho no equipamento é de 65 minutos para as amostras negativas com a realização da pesquisa de resistência À rifan piscina nas amostras positivas o tempo para a emissão do resultado é de 77 minutos o

kit é composto de cartuchos de reação reagente de preparação pipetas pastel e CD de informações materiais que não vem no Kit e são utilizados papel absorvente para forrar as bancadas álcool 70º tubos Falcon de 15 ml caneta de retroprojetor ou similar relógio temporizador ou cronômetro sacos autoclaváveis para descarte de material lixeira para lixo comum lixeira para lixo contaminado epis jaleco de manga longa luvas para procedimentos sem talco gorro e máscara facial N95 ou pff2 equipamentos opcionais centrífuga refrigerada cabine de segurança biológica Classe 2 A2 ou B2 a itador tipo vórtex a realização do trm TB

assim como a baciloscopia e a cultura para micobactérias depende fundamentalmente da qualidade e da quantidade da amostra para que os resultados sejam confiáveis o trmb utiliza prioritariamente amostras primárias Isto É em Natura que inclui amostras pulmonares entre elas escarro escarro induzido lavado brônquico e lavado broncoalveolar e amostras extrapulmonares incluindo licor lavado gástrico líquido pleural urina biópsias de linfonodos e de outros tecidos eventualmente pode ser feito com o sedimento de amostras primárias atenção o trm TB não pode ser realizado em amostras de fezes de sangue ou amostras que contenham sangue para trmt a estabilidade das amostras

primárias sob refrigeração é de até 7 dias de modo geral serão aceitas para trm TV amostras com volume mínimo de 1 ml e sem a presença de sangue ou resíduos de alimentos de acordo com a classificação de risco biológico para os procedimentos laboratoriais da tuberculose o trm TB pode ser realizado na bancada nas mesmas condições recomendadas para a baciloscopia no entanto se houver cabine de segurança biológica disponível realizar o procedimento na cabine para iniciar o trmt Organize sua área de trabalho e assegure-se de que dispõe de todos os materiais necessários para a realização dos Testes

e que eles estejam dispostos na sequência de utilização em todos os locais onde se manuseia material biológico existe o risco de contaminação com o agente infeccioso portanto usar sempre os equipamentos de proteção individual a seguir apresenta-se o passo a passo e os cuidados que devem ser tomados na execução do trmb pararse com os epis ligar o equipamento genexpert sempre Antes de iniciar o software genexpert DX ligar o computador selecionar as amostras que serão submetidas ao trmt e reservar o número de cartuchos correspondente ao número de amostras identificar a lateral de cada cartucho com o número

da amostra e as iniciais do paciente usando caneta de retroprojetor preste atenção para não obstruir O que é recod e para não tocar no tubo de reação do Cartucho transferir cerca de 2 ml de escarro para um tubo Falcon já identificado com o número da amostra lembre-se o volume mínimo de escarro para a preparação é de 1 ml adicionar o reagente de preparação da amostra para trm tb na proporção de dois volumes de reagente para um volume de amostra fechar o tubo Falcon agitar o tubo vigorosamente de 10 a 20 vezes ou utilizar o Vortex

por 10 segundos incubar por 10 minutos em temperatura ambiente agitar novamente de 10 a 20 vezes ou em vórtex por 10 segundos incubar mais 5 minutos em temperatura ambiente antes de prosseguir certificar-se que a amostra está totalmente liquefeita sem qualquer grumo ou viscosidade caso contrário agitar novamente e deixar a temperatura ambiente por mais 5 a 10 minutos Esta etapa de descontaminação e liquefação não deve ultrapassar 35 minutos abrir a tampa do Cartucho aspirar com a pipeta pter no tubo Falcon cerca de 2,5 ml da amostra liquefeita e transferir 2 ml para o o orifício localizado

no lado direito do Cartucho cuidado não esgotar a pipeta até o fim para evitar a formação de bolhas descartar a pipeta e o tubo Falcon como lixo infectante fechar a tampa do Cartucho e levá-lo próximo ao gen Expert para efetuar o cadastro da amostra no sistema atenção tenha dado para nunca virar nem inclinar o cartucho que está com a amostra abrir a sessão do Windows 7 selecionar o nome do usuário e digitar a senha do operador clicar duas vezes sobre o ícone genexpert DX na área de trabalho do computador para a abertura do programa clicar

em Create test para acionar o leitor de código de Carry code abrirá uma tela a leitura do código escanear o código do cartucho ou caso o leitor não funcione digitar o número do Cartucho manualmente cadastrar nos campos correspondentes o nome do paciente e o código gerado no sistema de gerenciamento de ambiente Laboratorial Gal para aquela amostra se a amostra não for escarro preencher o campo sample Type com o o tipo da amostra aguardar o genexpert emitir um sinal luminoso indicando o módulo a ser utilizado inserir o cartucho e fechar o módulo a reação de PCR

tem início O que é indicado por um sinal luminoso que permanece aceso até o término da PCR no final da PCR O resultado é automaticamente gravado no sistema e pode ser impresso quando a impressora acoplada o sinal luminoso apaga e a porta do módulo destrava permitindo a retirada do Cartucho desprezar o cartucho no lixo infectante os resultados são lidos pelo sistema genexpert DX a partir da emissão de sinais de fluorescência agora vamos ver como os resultados são liberados pelo sistema MTB não detectado interpretado como negativo para tb MTB detectado traços Esse resultado é considerado positivo

nas PV HIV e nas crianças com menos de 10 anos de idade com suspeita de tb extrapulmonar porém a sensibilidade à rifan piscina é indeterminada nesses casos entretanto para a população geral e para profissionais de saúde pessoas privadas de liberdade pessoas em situação de rua indígenas e para contatos de tb resistente o resultado traços é considerado inconclusivo MTB detectado e resistência À rifan piscina não detectada MTB detectado e resistência a rifan piscina detectada MTB detectado e resistência À rifan piscina indeterminada Sem resultado inválido erro o sistema detecta erro durante o processo atenção nesses casos é

importante monitorar os resultados Inválidos e com erros de acordo com as recomendações do Ministério da Saúde o trm TB para diagnóstico de tb ativa deve ser utilizado segundo algoritmos específicos para as populações que estão sendo investigadas o trm TB está indicado para o diagnóstico de casos novos de tb pulmonar e extrapulmonar e para a verificação de resistência a rifan piscina nos casos de retratamento o trmb por sua alta sensibilidade é um teste importante para a detecção de tb na população vivendo com HIV e nas amostras paus bacilares o diagnóstico e o tratamento precoces de tuberculose

nas PV HIV tem grande importância no controle do curso Clínico dessas infecções reduzindo a morbidade e a letalidade nessa população assim sendo o teste para HIV deve ser oferecido a todas as pessoas com tuberculose no momento do diagnóstico de ITB ou no mais rapidamente possível o teste rápido para HIV está disponível nas unidades básicas de saúde e é utilizado como teste inicial para o diagnóstico da infecção por esse vírus o rastreio da atb e da infecção latente pelo M tuberculoses na população vivendo com HIV deve ser realizado de forma complementar e sistemática uma vez confirmada

a coinfecção tb HIV o paciente deve ser encaminhado ao serviço de atenção especializada ou para a unidade dispensadora de medicamentos para PV HIV mais próxima de sua residência para continuar o tratamento da tb ativa ou latente e iniciar o tratamento da infecção pelo HIV [Música] [Música] eh and [Música]